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TK 基因突變試劑盒的原理及優勢

更新時間:2021-04-06      點擊次數:2733
  TK 基因突變試驗的原理:
 
  TK 基因突變試驗的檢測終點是 TK 基因的突變。TK 基因突變屬于常染色體基因突變。
 
  TK 基因的產物胸苷激酶在體內催化從脫氧胸苷(TdR)生成胸苷酸(TMP)的反應。在正常情況下,此反應并非生命所必需,原因是體內的 TMP 主要來自于脫氧尿嘧啶核苷酸(dUMP),即由胸苷酸合成酶催化的 dUMP 甲基化反應生成 TMP。但如在細胞培養物中加入胸苷類似物(如三氟胸苷,即 trifluorothymidine,TFT),則 TFT 在胸苷激酶的催化下可生成三氟胸苷酸,進而摻入 DNA,造成致死性突變,故細胞不能存活。若 TK 基因發生突變,導致胸苷激酶缺陷,則 TFT 不能磷酸化,亦不能摻 DNA,故突變細胞在含有 TFT 的培養基中能夠生長,即表現出對 TFT 的抗性。根據突變集落形成數可計算突變頻率,從而推斷受試物的致突變性。在 TK 基因突變試驗結果觀察中可發現兩類明顯不同集落,即大/小集落(L5178Y 細胞)或正常生長/緩慢生長集落(TK6 細胞),有研究表明,大集落/正常生長集落主要由點突變或較小范圍的缺失等引起,而小集落/緩慢生長集落主要由較大范圍的染色體畸變,或由涉及調控細胞增殖的基因缺失引起。
 
  TK 基因突變試劑盒優勢:
 
  便捷—— 本試劑盒省去了誘導 S9 制備,陽性底物、篩選培養基的配制和濃度條件摸索的時間,可以直接使用,大大縮短了實驗周期。
 
  準確——本試劑盒各成分均經過嚴格的質量檢測,無雜菌污染,誘導 S9 活性均符合 L5178Y 細胞基因突變試驗要求,實驗結果準確、可靠、重現性高。
 
  穩定—— 本試劑盒穩定性強、易于運輸和保存。
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