大鼠血漿的操作規(guī)程究竟是怎樣的？

　　1、大鼠取全血3.5或4.5ml,放置40min左右,4000r/10min離心。

　　2、向1.5mlEP管中依次加入20u1內(nèi)標(biāo)液、A中血漿100或150ul,渦旋30s,置-20℃凍存至樣品處理。

　　3、取大鼠血漿體積100或150u1(先放置4℃融化再拿至室溫),渦旋30秒,加入沉淀(甲醇:乙腈=1:3)400或600u1或萃取劑(乙酸乙酯)800或1200u1,渦旋1.5min14000r/10min離心。

　　4、取上清液加入1.5mlEP管:沉淀劑時為450或ul;萃取劑時為或ul。

　　5、氮?dú)獯蹈?0-45℃(吹干時間沉淀劑為45min左右,萃取劑為30min左右)。

　　6、用100u1甲醇復(fù)溶,渦旋2min,1400r/10min離心。

　　7、進(jìn)樣瓶處理:先加入100u1甲醇,放入內(nèi)插管。

　　8、取上層液體90ul加入進(jìn)樣瓶內(nèi)插管中,將瓶蓋用保鮮膜包裹后蓋上放入4℃至進(jìn)樣。

　　9、用液相進(jìn)樣時體積為10或20u。
 

　　大鼠血漿的操作注意事項？

　　1、實驗過程中所使用的耗材都為進(jìn)口級(EP管,槍頭等),除取全血時EP管使用國產(chǎn)。

　　2、需要血漿量根據(jù)實驗結(jié)果制定選擇100或150u1。

　　3、加入血漿及20u1內(nèi)標(biāo)液時一定要認(rèn)真,細(xì)心,加藥過程嚴(yán)格按照移液槍操作規(guī)程,保證結(jié)果的準(zhǔn)確度、精密度。

　　4、實驗過程樣品處理時EP管標(biāo)號一定要清楚、仔細(xì),操作過程做好有一個人在旁邊檢査或處理完一個換一個位置。

　　5、實驗樣品處理一定要一套一套處理(一只鼠的樣品一次處理完畢),以減小結(jié)果誤差同時樣品不容易混淆、出錯。